遵循顯微鏡設計須符合樣品要求的原則,創(chuàng )建了一套完全模塊化的成像平臺,可以滿(mǎn)足多種實(shí)驗需求。與傳統的研究技術(shù)(例如使用微電極)相比,我們的多光子成像系統能夠以更快速度、更大深度和更高強度同時(shí)讀出和操縱神經(jīng)元群。我們開(kāi)發(fā)了一個(gè)旋轉主體,使顯微鏡可繞樣品旋轉。我們還提供各種剛性主體,其具7.74英寸高度,可圍繞物鏡提供較大的三維工作空間。
神經(jīng)元活動(dòng)的體內體積成像需要亞微米級空間分辨率和毫秒級時(shí)間分辨率。傳統方法通過(guò)連續掃描衍射高斯光束以創(chuàng )建3D圖像,而基于貝塞爾光束的多光子成像依靠軸向延伸的焦點(diǎn)來(lái)捕獲體積圖像。激發(fā)光束的擴展景深可創(chuàng )建3D體積的2D投影,從而有效地將2D幀速率轉換為3D體積速率。
三光子激發(fā)非常適合深層組織成像,且需要高脈沖能量激發(fā)源,通常在1300 nm或1700 nm附近。與雙光子成像相比,三光子成像可減少組織散射并降低離焦背景,從而提高信噪比。
Thorlabs的空間光調制器(SLM)使用全息圖案來(lái)同時(shí)刺激樣品中多個(gè)位置的光活化。SLM設計用于通過(guò)飛秒脈沖進(jìn)行雙光子激發(fā),SLM可控制激勵激光束輪廓上的相位以生成數百個(gè)用戶(hù)確定的焦點(diǎn)。